Имеется ограниченное число работ, посвященных изучению показателей неспецифической резистентности у больных псевдотуберкулезом. В некоторых случаях они носят противоречивый характер.

Система комплемента. Комплемент сыворотки крови является одним из объективных показателей состояния иммунологической реактивности организма. Снижение титра комплемента свидетельствует об ослаблении защитных сил организма и нарастании степени аллергизации, а повышение комплементарной активности — о нарастании защитных функций и о десенсибилизации организма.

Исследованию взаимодействия иерсиний с системой комплемента посвящено незначительное число работ. Показано, что наличие у псевдотуберкулезных бактерий плазмид с мол.м, 45 md обеспечивает бактериям устойчивость к опсонизации в отсутствие специфических антител и резистентность к бактерицидному действию сыворотки. Специфические антитела к иерсиниям приводят к активации комплемента по классическому пути и отменяют ингибирующее влияние продуктов генов плазмиды с мол.м. 45 md на опсонизацию бактерий.

При исследовании изменений уровня комплемента в сыворотке крови у больных псевдотуберкулезом В.П. Малый и Б.А. Федорец получили разные сведения. Так, материалы последнего свидетельствуют о том, что активность комплемента на всех стадиях инфекционного процесса примерно в 2 раза выше, чем у здоровых лиц. По данным В.П. Малого, уровень комплемента при легком течении болезни падает до 65 ± 2,9 г/мл (у здоровых — 72,5 ± 3,1), при более тяжелом — до 53,8 ± 3,2 г/мл. На 2-й неделе болезни происходит дальнейшее снижение концентрации комплемента. Если с 3-й недели заболевания показатели комплемента при легком течении болезни повышаются до 61 ± 3,4 г/мл, то при среднетяжелом и тяжелом течении они остаются на прежнем уровне. Нормализация его показателей происходит на 4-й неделе. При рецидивирующем течении псевдотуберкулеза содержание комплемента в сыворотке крови, по данным этого автора, меняется значительнее. Вышеизложенные материалы касаются лишь общей гемолитической активности комплемента. Проведенные нами исследования позволили получить более полное представление об изменениях в системе комплемента, поскольку определялась активность составляющих систему комплемента компонентов.

Анализ изменений в системе комплемента на основе изучения активности C1—С5 и Co при псевдотуберкулезе показал, что у больных происходит снижение как общей гемолитической активности комплемента, так и его фракций. Степень изменений C1—С5 и Co соответствует тяжести патологического процесса. Легкая степень заболевания характеризуется кратковременным (1—2 нед) незначительным снижением функциональной активности C1 и С5. При среднетяжелом течении болезни в той или иной мере происходит снижение всех исследованных показателей. Восстановление активности компонентов регистрируется в различные сроки. Быстро нормализуются показатели С2 и Co. Позже других восстанавливается активность C1 и С5. Наиболее значительное снижение активности C1—С5 и Co наблюдается при тяжелом течении псевдотуберкулеза. Клиническое выздоровление в последнем случае не приводит к восстановлению комплементарной активности. Рецидивирующее течение заболевания характеризуется снижением активности C1—С5 и Co в основную волну болезни и во время рецидива.

Снижение активности C1—С5 и Co при псевдотуберкулезе является, по-видимому, следствием активации системы комплемента по классическому пути. Определенное значение имеют также незавершенность фагоцитоза и гибель макрофагов — продуцентов белков системы комплемента, нарушение биосинтеза компонентов в пораженных органах. Патологоанатомическими, клиническими и экспериментальными исследованиями установлено, что при псевдотуберкулезе поражаются именно те органы, которые служат основными источниками синтезируемых компонентов комплемента — печени, селезенки, кишечника, лимфатических узлов.

По существующим представлениям, основными инициаторами классического пути активации комплемента становятся иммунные комплексы, которые взаимодействуют с C1. Отмечая снижение общей комплементарной активности у больных псевдотуберкулезом, В.П. Малый и В.Б. Туркутюков    высказали предположение, что одной из причин этого явления может быть включение комплемента в состав комплексов антиген — антитело. Несмотря на выраженные продолжительные функциональные сдвиги C1 комплемента, нам не удалось выявить корреляционной связи между уровнем ЦИК и активностью C1. Это обстоятельство, вероятно, объясняется гетерогенностью ЦИК, различающихся по способности фиксировать комплемент. Косвенным подтверждением этого предположения может служить установленная нами неоднородность иммунокомплексного спектра сывороток крови экспериментальных животных и больных псевдотуберкулезом. Участие комплемента в защите от бактерий псевдотуберкулеза может проявляться активацией деятельности фагоцитов. Бактерицидная активность ПМЯЛ и моноцитов в значительной степени зависит от процесса опсонизации, предшествующего захвату и внутриклеточному перевариванию микробов.

Наиболее сильными сывороточными опсонинами являются иммуноглобулины и СЗb. В наших исследованиях показано, что опсоническая активность сывороток крови при псевдотуберкулезе обусловлена как термостабильными, так и термолабильными факторами. В то же время не выявлено корреляции между уровнем опсонической активности сывороток и титрами антител разной физико-химической природы в них. Наблюдаемое нами снижение активности С3 может расцениваться как свидетельство активации этого компонента, следствием чего всегда является образование фрагмента СЗb.

Следует также учесть совпадение сроков снижения комплементарной активности в наблюдаемых нами случаях с периодом низкой опсонической активности сыворотки крови в более ранних наших исследованиях. Подтверждением этого могут служить данные D. Fertti и др. об эффективной опсонизации Y. pseudotuberculosis через классический путь активации комплемента. Вместе с тем эти авторы обращают внимание на значение специфических антител, которые, помимо участия в активации классического пути комплемента, нейтрализуют ингибирующее влияние плазмидосодержащих штаммов иерсиний на опосредованную комплементом опсонизацию.

Высокая частота кожных проявлений у больных псевдотуберкулезом наряду с выраженными по сравнению с другими компонентами изменениями активности С5 не исключает влияния С5 на проницаемость кровеносных сосудов, учитывая известные анафилатоксические свойства фрагмента С5а и комплекса С567. Снижение активности C5 нами наблюдалось и в тех случаях, когда другие показатели достоверно не отличались от контрольного уровня. Подобная ситуация отмечалась при легкой форме и в поздние сроки среднетяжелого течения псевдотуберкулеза. По-видимому, причиной этого также может быть нарушение синтеза указанного компонента, тем более что одним из источников образования С5 является кишечный эпителий, который при псевдотуберкулезе подвержен значительным изменениям деструктивно-воспалительного характера. Зависимость между изменениями активности C1—С5 и Co и тяжестью патологического процесса при псевдотуберкулезе отражает их причинно-следственные отношения в организме больного. С одной стороны, разная степень висцеральных нарушений может приводить к различиям в изменении активности системы комплемента, с другой — разный исходный уровень комплемента может определять степень тяжести воспалительного процесса.

Иммунные комплексы. Формирование ЦИК представляет собой естественный процесс, сопряженный с развитием гуморального иммунного ответа на любое антигенное воздействие и направленный на сохранение иммунного гомеостаза организма. В сыворотке крови здоровых лиц обнаруживается постоянный уровень ЦИК. Вместе с тем существуют убедительные доказательства участия ЦИК в разнообразных патологических процессах вплоть до развития болезней иммунных комплексов.

Одной из причин возникновения иммунокомплексной патологии, несомненно, является длительная персистенция ЦИК вследствие нарушения их элиминации из организма с последующим депонированием в тканях. Основная часть образующихся ЦИК удаляется из организма фагоцитирующими клетками. Эффективность этого процесса определяется как свойствами иммунных комплексов, так и функциональной активностью самих фагоцитов.

Существенное влияние на процессы иммунокомплексообразования оказывает система комплемента посредством различных механизмов, в норме направленных на предотвращение цитопатогенного действия иммунных комплексов и выведение их из организма. Известно, что классический путь активации комплемента предупреждает преципитацию иммунных комплексов путем блокады Fe—Fc-взаимодействий. Если же нерастворимые иммунные комплексы все же образуются, происходит их солюбилизация с преимущественным участием в этом процессе альтернативного пути активации комплемента.

Данные литературы свидетельствуют об участии процессов иммунокомплексообразования в развитии иерсиниозов вообще и псевдотуберкулеза в частности. На модели экспериментальной псевдотуберкулезной инфекции установлено появление иммунных комплексов в крови и паренхиматозных органах зараженных животных со 2—3-х суток. Специфические антигены в составе иммунных комплексов в больших концентрациях определяются в паренхиматозных органах. Максимальное содержание специфических иммунных комплексов в тканях соответствует пику инфекционного процесса (6-е сутки), в более поздние сроки (с 9-х суток) их уровень повышается в крови. Дальнейшее развитие заболевания сопровождается элиминацией как циркулирующих, так и фиксированных в тканях специфических иммунных комплексов с нормализацией показателей к 21-м суткам. У большинства больных иерсиниозом и псевдотуберкулезом установлено образование ЦИК, однако только в 32—-42 % случаев они включают специфические антигены возбудителя. Специфические ЦИК отмечались преимущественно при легком течении в остром периоде болезни и, как правило, выявлялись на фоне высокой концентрации антител против возбудителя инфекции.

Литературные данные, отражающие особенности динамики уровня ЦИК при различных клинических вариантах псевдотуберкулеза, довольно противоречивы. По мнению Ю.И. Ляшенко и соавт., смешанная, артралгическая и абдоминальная формы псевдотуберкулеза в отличие от катаральной, скарлатиноподобной и желтушной форм, при которых количественное содержание ЦИК на протяжении всего заболевания почти не отличается от нормальных значений, сопровождаются умеренным повышением их уровня в начальном периоде и в разгар болезни. Другие данные свидетельствуют о значительном повышении содержания ЦИК при псевдотуберкулезе, особенно у больных с артралгической формой и рецидивирующим течением заболевания. Высокий уровень ЦИК в крови больных людей и экспериментальных животных и его корреляция с выраженностью канальцевых нарушений свидетельствуют о иммунокомплексном поражении почек.

В проводимых нами исследованиях концентрация ЦИК в процессе заболевания повышалась у 88 % больных. Повышение уровня ЦИК в крови происходило с 1-й недели заболевания. Псевдотуберкулез легкой и средней степени тяжести характеризовался двукратным нарастанием концентрации ЦИК. По периодам болезни различий в уровне ЦИК не было. Наиболее высокие показатели установлены на 3-й неделе при тяжелом течении процесса. Повышение образования ЦИК отмечалось на протяжении 3 нед с момента первых клинических проявлений. Параллельно повышению концентрации ЦИК происходило нарастание титров специфических антител. Однако выявить достоверных корреляционных связей между этими показателями нам не удалось. Одной из причин повышения концентрации ЦИК в течение заболевания может быть включение специфических антител в состав ЦИК. Огносительно высокие значения уровня ЦИК при наименьших титрах специфических антител на 1-й неделе болезни могут расцениваться как свидетельство образования ЦИК в ранние периоды инфекционного процесса за счет неспецифических иммуноглобулинов, как это отмечается при других инфекциях. Перед выпиской из стационара нормализация уровня ЦИК наблюдалась только у 6,3 % больных, стабильный уровень — у 12,5 %, снижение уровня — у 43,7 %, а повышение показателей — у 37,5 % больных. Таким образом, у большинства наблюдаемых нами больных псевдотуберкулезом к моменту выписки из стационара нормализации показателей ЦИК не отмечалось, что свидетельствует о затяжном характере патологического процесса и необходимости диспансерного наблюдения за реконвалесцентами.

Проведенными нами исследованиями установлено, что иммунокомплексный спектр сывороток крови больных псевдотуберкулезом неоднороден. В кровотоке присутствуют ЦИК мелкого, среднего и крупного размера. При среднетяжелом, тяжелом и рецидивирующем течении болезни преобладают низкомолекулярные иммунные комплексы, размер ЦИК при заболевании легкой степени тяжести не отличается от таковых контрольной группы. Для больных с рецидивирующим течением псевдотуберкулеза характерно повышенное содержание ЦИК в основном периоде и во время рецидивов независимо от сроков их развития. Различий в уровне ЦИК при различных клинических формах псевдотуберкулеза нами не отмечено. Считаем, что это, по-видимому, связано с единым принципом формирования комплекса антиген — антитело, который определяется однотипным влиянием возбудителя на иммунную систему инфицированного организма в результате первичной бактериемии. Это согласуется и с мнением Л.М. Исачковой, которая считает, что псевдотуберкулез любой клинической формы протекает как генерализованная инфекция. С этой позиции вполне объясним тот факт, что при всех клинических формах псевдотуберкулеза, за исключением абдоминальной, нами отмечалось преобладание ЦИК мелкого размера. В целом же снижение активности системы комплемента и функциональная недостаточность фагоцитирующих клеток, характерная для псевдотуберкулеза, замедляют процесс элиминации ЦИК и способствуют временному увеличению их концентрации в кровотоке. Одновременное уменьшение размеров ЦИК может обеспечивать их депонирование в тканях, усугубляя тем самым развившийся под действием возбудителя и его токсинов патологический процесс.

Как следует из представленных материалов, состояние неспецифической резистентности у больных псевдотуберкулезом изучено еще недостаточно. В обзоре немногочисленных работ по этому вопросу много противоречивых данных, что объясняется разными методами исследования, различными контингентами обследуемых лиц и, возможно, разными сезонами, в которые обследовались больные. Поэтому у этого контингента больных необходимо глубокое изучение гуморальных и клеточных факторов неспецифической резистентности. Такие исследования позволят корректировать иммунный ответ во время болезни при помощи различных иммуномодуляторов.

Экспериментальное обоснование клинического применения иммунокорректоров природного происхождения при псевдотуберкулезе. Как уже указывалось, дисбаланс, развивающийся на уровне фагоцитирующих клеток с угнетением широкого спектра функций ПМЯЛ и клеток СМФ, играет решающую роль в исходе псевдотуберкулезной инфекции и диктует необходимость его устранения. В связи с этим в течение ряда лет нами проводилось систематическое изучение иммуномодулирующей активности биополимеров природного происхождения, полученных в лабораториях Тихоокеанского института биоорганической химии ДВО РАН, Тихоокеанского института рыбного хозяйства и океанографии и Научно-исследовательского рыбохозяйственного центра.

При изучении фагоцитоза Y. pseudotuberculosis в лейкоцитах крови морских свинок, получивших иммуномодуляторы (гликопротеины, пептиды, полисахариды) в модельной системе in vitro, фагоцитарная активность ПМЯЛ во все исследуемые сроки оставалась по сравнению с контролем на значительно более высоком уровне: резко увеличивалась способность клеток поглощать и переваривать микроорганизмы, обеспечивая завершенный фагоцитоз. Как показали наши исследования, при заражении мышей вирулентным штаммом Y. pseudotuberculosis ПМЯЛ в месте воспаления захватывали бактерии только в первые 3—4 ч инфекции, после чего фагоцитарная активность клеток снижалась вследствие развития у бактерий резистентности к поглощению этими клеточными элементами. Под действием изучаемых биополимеров, введенных парентерально, увеличивалось содержание ПМЯЛ, а также пула мононуклеарных фагоцитов в брюшной полости мышей, зараженных Y. pseudotuberculosis. При этом значительно возрастала поглотительная и переваривающая активность ПМЯЛ, в результате чего экссудат брюшной полости животных, получивших биогликаны и пептиды, значительно быстрее очищался от возбудителя.

Изучение влияния биополимеров на состояние бактерицидных систем нейтрофилов показало, что гликопротеины (митилан) и пептиды (ганглиин) стимулируют метаболическую активность ПМЯЛ, усиливая способность к восстановлению нитросинего тетразолия в диформазан. Максимальный уровень индекса стимуляции окислительно-восстановительных реакций в ПМЯЛ мышей, получивших митилан, составлял 2,8, ганглиин — 3,3 (в контроле — 0,2). При изучении эффекторных функций макрофагов в системе in vivo установлено, что парентеральное введение гликопротеинов животным приводит к значительному усилению поглощения и выведения перитонеальными макрофагами меченных 14C Y.pseudotuberculosis. Так, из общего количества меченных 14C бактерий, введенных в брюшную полость мышей, перитонеальными макрофагами интактных животных поглощалось 24,2 % бактерий, а макрофагами мышей, получивших митилан, — 75,4 %. Индекс скорости выведения меченных макрофагами интактных мышей микроорганизмов составил 2,7, а меченных макрофагами стимулированных животных — 5,2, что свидетельствует об усилении катаболизма бактерий псевдотуберкулеза в макрофагах под действием иммуномодулятора. Макрофаги животных, получивших препараты из гидробионтов, подвергались и морфологическим изменениям. Методом сканирующей электронной микроскопии выявлены изменения поверхностной мембраны макрофагов, свидетельствующие об активации клеток (значительное их укрупнение, усиление распластанности по стеклу, появление большого количества крупных клапанообразных и гребнеподобных выростов). При просвечивающей электронной микроскопии обнаружена значительная ультраструктурная перестройка макрофагов — увеличение размера клеток, образование большого числа псевдоподий, резкая вакуолизация цитоплазмы, существенное увеличение количества лизосом, наличие митохондрий с уплотненным матриксом и плотно упакованными кристами.

Таким образом, исследования показали, что изученные нами биополимеры, полученные из морских гидробионтов и представителей дальневосточной флоры, способствуют повышению функциональной активности фагоцитирующих клеток при псевдотуберкулезе, обеспечивая усиление эффекторных функций ПМЯЛ и клеток СМФ, — поглощение, обезвреживание и переваривание, действуют на В- и Т-лимфоциты. При этом включение в процесс тех или иных систем и звеньев иммунитета и неспецифической резистентности, а также степень их активации зависят от используемого препарата, доз, сроков и способов его введения в организм. Фармакологическая регуляция фагоцитоза и других показателей защиты организма при помощи иммуномодуляторов открывает перспективу применения их в комплексной терапии инфекционных болезней, сопровождающихся, подобно псевдотуберкулезу, дефектами фагоцитарной системы.

Подводя итоги этого важного раздела учения о псевдотуберкулезной инфекции, можно констатировать, что достижения теоретической иммунологии, разработка новых препаратов, а также новых методов диагностики этой болезни создали предпосылки для успешного изучения некоторых вопросов противопсевдотуберкулезного иммунитета. Мы вправе ожидать в ближайшие годы дальнейшего прогресса в изучении теоретических проблем иммунологии псевдотуберкулеза и как следствие — усовершенствования иммунодиагностики и иммунотерапии псевдотуберкулеза.